本项目组开展微生物纤维堆囊菌发酵生产埃博霉素的研究已有10多年的历史,获得了10余项发明专利和多项国家重点领域项目资助。埃博霉素化合物生产方面的科研团队实力雄厚、生产技术先进、设备完善、并具有自主知识产权。
项目主要核心技术包括:
(1)生产菌株的 Genome shuffling 改良和高产菌株的高通量筛选。生产发酵产物的关键是高性能生产菌株的获得,高效生产菌株的获得必须依靠微生物育种技术的先进性。本项目开展的埃博霉素高产菌株的 Genome shuffling 育种是本项目研究的一项主要技术难点。
(2)细胞密度依赖性是粘细菌的一个基本特性,它使得粘细菌在自然生镜中能够形成群体优势而更依存活。但是,伴随着胞外多糖的产生,粘细菌在液体发酵时表现为成团成片生长,这不但使得菌体量过少,还能够造成营养物质和代谢产物的传输扩散阻力,使得发酵调控十分困难。并且产生了液体发酵体积与细胞量和次级代谢产物能力增加不同步的现象,极大地限制了粘细菌的规模化发酵。团队拟采取多孔陶瓷吸附固定菌体细胞发酵策略,解除埃博霉素产生菌生长的细胞密度依赖性,实现与一般细菌相同的液体分散生长。
(3)埃博霉素的分离纯化。发酵产物成分复杂,分离纯化成本是微生物药物生产成本的主要来源,减少分离提取步骤将较大提高药物的得率,降低提取成本。
项目的创新点包括:
(1)生产菌株的 Genome shuffling 改良和高产菌株的高通量筛选。生产发酵产物的关键是高性能生产菌株的获得,高效生产菌株的获得必须依靠微生物育种技术的先进性。
(2)多孔陶瓷固定化细胞发酵设备的设计以及相应发酵工艺的建立。多孔陶瓷为液体环境中生长的纤维堆囊菌细 胞提供固体生长附着面,解除埃博霉素生产菌株液体发酵聚 团生长行为,延长了埃博霉素的产生过程,提高埃博霉素液体发酵的产量。(来源: 陕西省科学技术协会)
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